分光光度計是以不連續(xù)的波長對反射物體或透射物體進(jìn)行采樣的測量器，將成分復(fù)雜的光分解為光譜線。不同的物體有不同的分子結(jié)構(gòu)，不同的波長對光的吸收能力也不同，所以每個物體都有特定的吸收光譜。

　　分光光度計使用產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置產(chǎn)生特定波長的光源，透過測量的樣品后，一部分光被吸收，樣品的吸光值被計算，轉(zhuǎn)換為樣品的濃度。在實際運(yùn)用過程中，有幾個因素導(dǎo)致儀器測量精度下降，包括以下幾點。

　　1、吸光度(透過率)精度

　　透射率和吸光度的誤差越大，測試結(jié)果的可靠性越差，顯然會影響測試數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。

　　2、波長精度

　　根據(jù)分光光度法的原理，照射到樣品池的單色光必須與樣品吸收光譜的任意一個吸收峰的波長相對應(yīng)。由于儀器的制造和調(diào)整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)之間存在一定的誤差。

　　樣品中大部分的主要吸收峰有一定的寬度，波長精度要求允許寬度。但是，在吸收峰寬度小且吸收峰的兩側(cè)邊緣比較陡的情況下，必須注意波長精度的影響。

　　3、雜散光

　　雜散光是由光學(xué)部件的制造誤差和光學(xué)部件和機(jī)械部件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也增大，對分析結(jié)果造成一定的誤差。

　　在紫外短波長區(qū)域，光源的強(qiáng)度和探測器的靈敏度明顯減弱，雜散光的影響不容忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的重要指標(biāo)之一。

　　4、基線的直線度

　　基線直線度是整個頻帶內(nèi)各波長的噪聲表現(xiàn)，基線直線度直接影響紫外可見分光光度計光度精度的靈敏度和檢測下限或使用范圍，是紫外可見分光光度計中非常重要的技術(shù)參數(shù)之一。

　　用戶購買和使用時，基線的平直度有這一特殊的重視程度，成為購買和使用的重要技術(shù)指標(biāo)。但是相對于影響儀器檢測精度的其他因素，基線的平直度是目前國內(nèi)外研究者重視程度不夠的技術(shù)指標(biāo)。

　　5、頻譜帶寬

　　光譜帶寬是影響紫外可見分光光度計光度精度的重要因素。如果光譜帶寬不同，由于測試得到的數(shù)據(jù)不同，因此光譜帶寬不同，分析誤差也有很大差異。